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      人NOD樣受體(NLR)檢測試劑盒Human NOD-like receptor9,NLR ELISA試劑盒2022資料已更新

      更新時間:2022/10/25 15:08:41         閱讀:365
       據新聞部10月25日15點13分透露:人NOD樣受體(NLR)檢測試劑盒Human NOD-like receptor9,NLR ELISA試劑盒2022資料已更新

      http://www.app17.com/c164984/products/d11529891.html 

       

      本試劑僅供研究使用

      試劑盒組成:

      試劑盒組成 48 孔配置 96 孔配置 保存

      說明書 1 份 1 份

      封板膜 2 片(48) 2 片(96)

      密封袋 1 個 1 個

      酶標包被板 1&times;48 1&times;96 2-8℃保存

      標準品:90ng/L 0.5ml&times;1 瓶 0.5ml&times;1 瓶 2-8℃保存

      標準品稀釋液 1.5ml&times;1 瓶 1.5ml&times;1 瓶 2-8℃保存

      酶標試劑 3 ml&times;1 瓶 6 ml&times;1 瓶 2-8℃保存

      樣品稀釋液 3 ml&times;1 瓶 6 ml&times;1 瓶 2-8℃保存

      顯色劑 A 液 3 ml&times;1 瓶 6 ml&times;1 瓶 2-8℃保存

      顯色劑 B 液 3 ml&times;1 瓶 6 ml&times;1 瓶 2-8℃保存

      終止液 3ml&times;1 瓶 6ml&times;1 瓶 2-8℃保存

      濃縮洗滌液 (20ml&times;20 倍)&times;1 瓶 (20ml&times;30 倍)&times;1 瓶 2-8℃保存

      樣本處理及要求:

      1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上

      清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

      2. 血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心

      20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次

      離心。

      3. 尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程

      中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

      4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/

      分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞

      濃度達到 100 萬/ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分

      鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備

      用。標本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或勻漿器

      將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待

      檢測,其余冷凍備用。

      6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上

      進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

      7. 不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

      操作步驟

      1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔 10 孔,在、第二孔中分別加標

      準品 100&mu;l,然后在、第二孔中加標準品稀釋液 50&mu;l,混勻;然后從孔、第二

      孔中各取 100&mu;l 分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液 50&mu;l,

      混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取 50&mu;l 棄掉,再各取 50&mu;l 分別加到第五、第六孔

      中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液 50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各

      取 50&mu;l 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50&mu;l,混

      勻后從第七、第八孔中分別取 50&mu;l 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準

      品稀釋液 50&mu;l,混勻后從第九第十孔中各取 50&mu;l 棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為 50&mu;l,

      濃度分別為 60ng/L,40ng/L ,20ng/L,10ng/L, 5ng/L)。

      2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣

      品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40&mu;l,然后再加待測樣品 10&mu;l(樣

      品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混

      勻。

      3. 加酶:每孔加入酶標試劑 50&mu;l,空白孔除外。

      4. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

      5. 配液:將 30(48T 的 20 倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30(48T 的 20 倍)倍稀釋后備用。

      6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 后棄去,如此

      重復 5 次,拍干。

      7. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50&mu;l,再加入顯色劑 B50&mu;l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

      10 分鐘.

      8. 終止:每孔加終止液 50&mu;l,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

      9. 測定:以空白孔調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止

      液后 15 分鐘以內進行。

      注意事項:

      1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未

      用完,板條應裝入密封袋中保存。

      2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

      3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好

      控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

      4. 請每次測定的同時做標準曲線,好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值

      大于標準品孔孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計

      算時請后乘以總稀釋倍數(&times;n&times;5)。

      5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

      6. 底物請避光保存。

      7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

      8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

      29. 本試劑不同批號組分不得混用。

      10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

      計算:

      以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,

      在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的 OD

      值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋

      倍數;或用標準物的濃度與 OD 值計算出標

      準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值

      代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋

      倍數,即為樣品的實際濃度。

      試劑盒性能:

      1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數 R 值為 0.92 以上。

      2.批內與批間應分別小于 9%和 15%

      檢測范圍:

      2ng/L -80ng/L

      保存條件及有效期:

      1.試劑盒保存:2-8℃。

      2.有效期:6 個月


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