產品詳情

1、收到細胞后，請按照以下方法進行操作：取出25cm 2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中靜置3-4小時以穩定細胞狀態，然后換用新鮮完全培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代： 1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm 2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次； 2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min； 3）棄上清，沉淀細胞用12ml完全培養基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，*后放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
3、細胞凍存： 1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm 2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次； 2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min； 3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中； 4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
4、細胞復蘇： 1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁； 2）將凍存管中的細胞移至含5ml完全培養基的15ml離心管中， 1000rpm離心5min； 3）棄上清，沉淀用5ml完全培養基重懸，接種25cm2培養瓶，于37℃，5%CO2細胞培養箱中培養； 4）第二天，換用新鮮完全培養基繼續培養。 ______細胞本公司細胞引種來源：ATCC、DSMZ、ECACC、武大細胞庫、上海生化細胞所、中國科學院典型培養物保藏委員會等細胞處理方法：一、貼壁細胞 1、接收到細胞，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。 2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。 3、嚴格遵循無菌操作規范，打開細胞培養瓶。 4、37度平衡1-2小時。 5、用移液管吸取培養基，到50ml離心管中，剩下細胞密度達到80%至90%可以傳代，如沒有達到添加6ml新鮮培養基繼續培養。
6、如果肉眼檢查上清有細胞，對50ml上清進行離心收集細胞，如果細胞連片狀態，棄掉上清對收集的細胞進行胰酶消化（1ml 胰酶37度），接種培養。
二、懸浮細胞
1、接收到細胞，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞 100X,200X 各一張）。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。
3、嚴格遵循無菌操作規范，打開細胞培養瓶。
4、細胞培養瓶內的培養基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒）。
5、1000rpm，5min 離心，用吸管小心吸出上清，加入培養基，重懸細胞。
6、將重懸好的細胞轉入六孔板或者細胞培養瓶種，加入新鮮培養基，置于 37℃，5%CO2 培養（大部分細胞）。
培養操作：華拓細胞培養操作指南細胞常見問題分析：細胞培養常見問題分析細胞在發貨前進行質檢：
1、細胞存種的活性檢測
2、細菌、真菌、霉菌污染物鏡檢
3、衣原體、支原體檢測（熒光法、培養法等）
產品質量保證及售后：
1、細胞為三代以內，活體。運輸過程中細胞出現污染和狀態不好，我們完全免費重新發貨。
2、實驗過程中若確定是客戶問題，客戶僅需支付物流和耗材費用，我們可重新發貨。其他根據情況靈活處理。
3、產品使用過程中，華拓生物可提供技術上的指導。
使用方法一，燒瓶培養的處理程序在培養瓶中接種細胞并在培養基中完全填充培養基以防止運輸過程中細胞的丟失。
1、收到后，目視檢查培養物是否有微生物污染的宏觀證據。使用倒置顯微鏡（配備有相位傳感器），仔細檢查是否有微生物污染的證據。還檢查以確定大多數細胞是否仍然附著在燒瓶底部？在運輸過程中，培養物有時被粗略地處理，并且許多細胞經常分離并懸浮在培養基中（但仍然是可行的）。
2、如果細胞仍然附著，無菌去除5至10毫升的運輸介質?？梢怨澥∵\輸媒介以重復使用。在5%℃的空氣中，在37℃下培養細胞，直到它們準備進行傳代培養。養基中重新沉淀顆粒細胞并加入25厘米的燒瓶中。在空氣中5%℃下，在37℃下孵育，直至細胞準備進行傳代培養。
二、傳代程序體積為75厘米的燒瓶。增加或減少其他尺寸培養容器所需的分離培養基的量。
1、去除和丟棄培養基。
2.用0.25%(w/v)胰蛋白酶0.53mM EDTA溶液沖洗細胞層，除去所有含有胰蛋白酶抑制劑的血清痕跡。
3.添加2.0~3.0 ml胰酶-EDTA溶液瓶中，倒置顯微鏡下觀察細胞到細胞層分散（取決于胰蛋白酶的批）。注意：為了避免結塊，不要在擊打或搖晃瓶子時攪拌細胞，等待細胞分離。難以分離的細胞可以放置在37°C以促進擴散。
4、加入6～8毫升的完整生長培養基，輕輕吸液，抽吸細胞。
5、在新培養容器中加入適當的細胞懸液等分試樣。
6、培養37°C培養基。推薦栽培比為1:3∶1:4。
介質更新：每周2至3次三、冷凍保存程序該協議使用量在75平方厘米的瓶；比例減少或增加的其他尺寸的分離介質的培養容器的數量。
1、去除和丟棄培養基。
2。簡要沖洗細胞層0.25（w/v）trypsin0.53mm EDTA溶液去除所有痕跡血清含有胰蛋白酶抑制劑。
3。加入2至3毫升的胰蛋白酶-EDTA溶液瓶中，倒置顯微鏡下觀察細胞到細胞層是分散的（通常在1到10分鐘）。注意：為了避免結塊，不要在擊打或搖晃瓶子時攪拌細胞，等待細胞分離。難以分離的細胞可以放置在37°C以促進擴散。
4、加入6～8毫升的完整生長培養基，輕輕吸液，抽吸細胞。
5。去除胰酶EDTA溶液，將細胞懸液到離心管和旋轉約5 1000rpmfor 10分鐘。
6、低溫保存培養液中的上清液和復蘇細胞。
7、將細胞轉移至低溫瓶，1ml／瓶。 8、低溫容器中的細胞Frozen（NalgENα5100-01）。

更新時間：2023/9/10 14:51:52

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神經膠質細胞瘤細胞,U251細胞

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